【佳學(xué)基因檢測】常染色體隱性多囊腎病 (ARPKD) 基因檢測：需檢測的基因與原因
常染色體隱性多囊腎病 (ARPKD) 基因檢測概述
常染色體隱性多囊腎病 (ARPKD) 是一種罕見但極為嚴重的遺傳性疾病，也是多囊腎病中最致命的類型之一，常導(dǎo)致兒童早期發(fā)展為終末期腎病 (ESRD)。該病主要由 PKHD1 基因突變引起，但近年的研究發(fā)現(xiàn)， DZIP1L 基因和一些纖毛基因也可能與模擬 ARPKD 樣表型譜的病例有關(guān)。通過細胞和動物模型，研究人員已深入解析了與 ARPKD 發(fā)病及進展相關(guān)的多種分子通路。佳學(xué)基因針對 ARPKD 的致病蛋白及分子機制進行了系統(tǒng)性分析與研究?；谶@些研究，《常染色體隱性多囊腎病 (ARPKD) 基因檢測：需檢測的基因與原因》全面回顧了 ARPKD 的臨床表現(xiàn)、治療進展、遺傳基礎(chǔ)及分子機制，并總結(jié)了該領(lǐng)域的最新科學(xué)發(fā)現(xiàn)。
關(guān)鍵詞：ARPKD、多囊腎病、罕見單基因疾病、腎病學(xué)
常染色體隱性多囊腎病 (ARPKD) 基因檢測的重要性
ARPKD 是一種由遺傳因素引發(fā)的罕見且嚴重的囊性腎病，主要表現(xiàn)為雙側(cè)腎臟囊性病變并伴有先天性肝纖維化，通常在圍產(chǎn)期或兒童期顯現(xiàn)癥狀，是兒童患病和死亡的主要原因之一。根據(jù)佳學(xué)基因檢測大數(shù)據(jù)分析，其發(fā)病率約為每 26,485 名新生兒中 1 例，年患病率為每 100,000 人中 1.17 人。而其全球普遍患病率估計為每 20,000 名新生兒中 1 例。
ARPKD 屬于多囊腎病 (PKD) 的隱性遺傳形式，是一類異質(zhì)性單基因疾病。而顯性遺傳形式，即常染色體顯性多囊腎病 (ADPKD)，流行病學(xué)患病率更高，通常在成年人中診斷。
常染色體隱性多囊腎病的臨床表現(xiàn)
常染色體隱性多囊腎病（ARPKD）具有高度變異的臨床表型，可在圍產(chǎn)期、新生兒期、嬰兒期、青少年期甚至青年成人期發(fā)病，且無性別或種族傾向。最嚴重的病例多見于妊娠晚期或新生兒期，表現(xiàn)為雙腎顯著腫大，回聲增強、皮髓質(zhì)分化不良，但腎形輪廓尚可辨認，并伴有多個微小囊腫。此外，常伴嚴重羊水過少或羊水不足，進而引發(fā)典型的 Potter 序列表現(xiàn)，包括肺發(fā)育不全、特征性面容及馬蹄內(nèi)翻足攣縮等。除 Potter 序列外，其他腎外表現(xiàn)較為少見。盡管尚無明確的肝臟表型記錄，但文獻中提到了一些相關(guān)情況，如腹腔難產(chǎn)。
嚴重羊水過少常提示預(yù)后不良，因肺發(fā)育不全的風險極高。約 50% 的 ARPKD 新生兒因肺發(fā)育障礙及胸廓受壓引發(fā)的呼吸衰竭而死亡。然而，存活至圍生期后的患兒總體預(yù)后較好，1 年和 10 年的生存率分別可達 85% 和 82%。存活患兒需接受專業(yè)內(nèi)科護理。需注意的是，產(chǎn)前診斷與妊娠終止在該病的流行病學(xué)中是不可忽視的因素。除尿毒癥和肺發(fā)育不良外，腎臟腫大及肺功能障礙還可能導(dǎo)致喂養(yǎng)困難，需依賴持續(xù)的鼻胃管營養(yǎng)支持[11,18]。
出生后頭幾個月，ARPKD 患兒常出現(xiàn)嚴重高血壓，通常需多種藥物控制。良好的血壓管理對避免進一步腎損傷至關(guān)重要。然而，腎功能衰竭并非常見的新生兒死亡原因。腎臟表現(xiàn)包括尿路感染、肉眼血尿及兒童早期腎性骨病。超聲常在腎臟顯著腫大之前即發(fā)現(xiàn)回聲增強及腎囊腫。腎臟腫大主要因集合管及遠端腎單位擴張所致。隨著病情進展，腎臟結(jié)構(gòu)逐漸類似于 ADPKD，出現(xiàn)形態(tài)不一的囊腫，伴間質(zhì)纖維化。約 50% 的患者在生命早期即發(fā)展為終末期腎病（ESRD），需腎臟替代治療。
盡管該病名為“常染色體隱性多囊腎病”，但肝臟囊性表現(xiàn)亦極為重要，這也是致病基因命名為“多囊腎與肝病1（PKHD1）”的原因。肝臟主要表現(xiàn)為多囊肝（PLD），其組織學(xué)基礎(chǔ)為肝導(dǎo)管板發(fā)育異常，即導(dǎo)管板畸形（DPM），該特征亦見于其他纖毛病。隨年齡增長，患者可逐漸出現(xiàn)肝病表現(xiàn)。最早期為先天性肝纖維化（CHF），常伴肝內(nèi)及肝外膽管擴張（Caroli 綜合征）。ARPKD 的肝臟表現(xiàn)主要包括：因進行性肝纖維化導(dǎo)致的門脈高壓，以及膽管炎。門脈高壓可致脾腫大、血小板減少、食管靜脈曲張，甚至嚴重出血。盡管如此，肝細胞功能通常保留，血清肝酶多在正常范圍，僅膽汁淤積指標可能異常，這也導(dǎo)致臨床上對肝病的評估與監(jiān)測較為困難。
約 10% 的 ADPKD 患者可發(fā)生腦動脈瘤，但 ARPKD 中僅有少數(shù)報告。高血壓是腦動脈瘤的主要危險因素，在 ADPKD 與 ARPKD 中均可見[28]。鑒于兒童腦動脈瘤極為罕見，一些病例可在早期即被診斷出。此外，ARPKD 還可伴隨其他腎外及肝外表現(xiàn)，如左心室肥大、反復(fù)呼吸道感染、神經(jīng)系統(tǒng)異常、眼底病變、腹痛、膿毒癥發(fā)作、脊柱及肢體畸形等。
雖然大多數(shù) ARPKD 患者病程類似，但表型表現(xiàn)可高度不典型。在老年人群中，部分病例僅表現(xiàn)為中度腎或肝受累，甚至僅有單一器官的表型。這一現(xiàn)象可能與 PKHD1 雜合突變攜帶者風險增加有關(guān)。雖然 ARPKD 為隱性遺傳，理論上雜合者無臨床表現(xiàn)，但研究發(fā)現(xiàn)，PKHD1 雜合突變可能增加 PLD 和輕度 PKD 的發(fā)病風險。
診斷
由于常染色體隱性多囊腎病（ARPKD）多在早期即表現(xiàn)出嚴重癥狀，常于產(chǎn)前被診斷。自妊娠中晚期起，超聲檢查即可發(fā)現(xiàn)腎臟增大、回聲增強及髓質(zhì)高回聲等特征，提示皮髓質(zhì)分化消失。肝實質(zhì)回聲彌漫增強并伴纖維組織增生也是典型表現(xiàn)。羊水過少會增加診斷難度，此時應(yīng)聯(lián)合應(yīng)用超聲和胎兒 MRI 以提高診斷準確性。
約 30% 的 ARPKD 病例在超聲中可見微囊腫（5–7 毫米），而直徑大于 10 毫米的囊腫較罕見，出現(xiàn)此類大囊腫常提示其他纖毛病，如 Meckel 綜合征。輕度病例可能難以通過產(chǎn)前超聲發(fā)現(xiàn)，在這類情況下，基因檢測可為明確診斷提供支持。
PKHD1 基因被鑒定后，可采用 Sanger 測序進行基因診斷。但由于該基因巨大且突變具有高度等位基因異質(zhì)性，PKHD1 的檢測較為復(fù)雜。目前已不推薦對疑似 ARPKD 患者僅進行單基因檢測，因為 ARPKD 的表型與其他纖毛病高度重疊。替代策略是采用下一代測序（NGS）等多基因并行檢測方法，能在單次檢測中低成本、有效地覆蓋多個相關(guān)基因。在極少數(shù)新生兒重癥病例中，甚至可能檢測到雙基因突變。
基因檢測結(jié)果對臨床管理至關(guān)重要，可指導(dǎo)疾病相關(guān)合并癥的識別與干預(yù)，并為遺傳咨詢和未來的精準醫(yī)學(xué)奠定基礎(chǔ)。
鑒別診斷
ARPKD表型并非僅由PKHD1基因突變引起。這使得診斷和管理（包括圍生期護理）變得十分困難。還需要考慮許多其他隱性和顯性基因的影響（圖1）。
圖 1.ARPKD鑒別診斷示意圖。PHKD1是ARPKD的主要致病基因，而DZIP1L的表型較輕。其他基因突變可能與ARPKD的臨床表現(xiàn)重疊，例如PKD1和PKD2是常染色體顯性多囊腎病（ADPKD）的主要致病基因；TSC2是結(jié)節(jié)性硬化癥（TSC）的致病基因；以及其他一些基因，例如HNF1β、腎癆（NPHP）基因以及其他纖毛病，例如Bardet-Biedl（BBS）、Joubert（JS）和Meckel綜合征（MKS）。這些重疊的表型體現(xiàn)了纖毛病基因之間存在的生理復(fù)雜性和功能性相互作用。
DZIP1L相關(guān)多囊腎病
在攜帶DZIP1L突變的患者中，已描述了中度常染色體隱性多囊腎病 (ARPKD) 表現(xiàn)。與該基因相關(guān)的首例報告病例發(fā)生在產(chǎn)前或兒童早期；然而，尚未見圍產(chǎn)期死亡病例的描述。
早期和重度常染色體顯性多囊腎病（ADPKD）
大多數(shù)情況下，ADPKD 在成年前不會出現(xiàn)臨床癥狀，但也有一小部分病例（高達 5%）在兒童期或出生前就已出現(xiàn)癥狀。目前尚無明確證據(jù)表明隨機性、表觀遺傳性和環(huán)境因素會改變表型。如果一個孩子早發(fā)性 ADPKD，其家族中其他兄弟姐妹的患病率通常也較高，因此我們認為存在家族性修飾因素，例如復(fù)雜的遺傳相互作用與第二個修飾因素。“劑量敏感網(wǎng)絡(luò)”可能會損害細胞完整性，并可能解釋這些患者更嚴重的臨床病程。
臨床上，常染色體隱性多囊腎病 (ARPKD) 與 ADPKD 之間存在顯著的重疊，但每種疾病也都存在一些特征性表現(xiàn)。與 常染色體隱性多囊腎病 (ARPKD) 患者不同，ADPKD 患者很少出現(xiàn)肝膽并發(fā)癥。此外，ADPKD 患者更容易出現(xiàn)心血管合并癥，尤其是顱內(nèi)動脈瘤。
TSC2-PKD1 導(dǎo)致的早期和嚴重 PKD
TSC1和TSC2基因突變會導(dǎo)致結(jié)節(jié)性硬化癥 (TSC)。這種多器官疾病主要與癲癇和皮膚表現(xiàn)相關(guān)。患者可能在腎臟、心臟和腦部出現(xiàn)非癌性腫瘤。腎臟表現(xiàn)是成年患者死亡的主要原因。當 16p 染色體缺失影響兩個相鄰基因（PKD1和TSC2 ）時，通常會導(dǎo)致 PKD 早期發(fā)作。此外，它們之間密切的生理相關(guān)性可以解釋 PKD 和 TSC 之間的臨床重疊；TSC2蛋白功能已被證明在協(xié)助多囊蛋白 1 定位中發(fā)揮作用。
HNF1β相關(guān)疾病
HNF1β/TCF2基因突變會導(dǎo)致產(chǎn)前腎臟高回聲和波特氏序列，以及可能與 常染色體隱性多囊腎病 (ARPKD) 混淆的多囊腎腫大。將這些相似表型聯(lián)系起來的一種解釋是，HNF1β是一種轉(zhuǎn)錄因子，除了調(diào)節(jié)其他多囊腎基因外，它還調(diào)節(jié)PKHD1 的表達。然而，該基因突變可導(dǎo)致多種表現(xiàn)：腎囊腫和糖尿病綜合征；生殖道缺陷；內(nèi)分泌/外分泌腺疾病、低鎂血癥和肝酶升高。
腎癆（NPHP）
NPHP 被歸類為常染色體隱性囊性腎病，其特征是伴有纖維化的腎小管間質(zhì)囊腫。到目前為止，約有 20 個基因與隱性 NPHP 相關(guān)。與 常染色體隱性多囊腎病 (ARPKD) 不同，NPHP 腎臟仍然較小。囊腫和高血壓通常僅在疾病晚期才顯現(xiàn)，并且是 25 歲以下患者 ESRD 的主要原因之一。在某些情況下，其表現(xiàn)可能類似于 ARPKD，腎臟腫大或 Potter 序列。NPHP 蛋白與其他纖毛病蛋白在功能網(wǎng)絡(luò)中協(xié)同作用；NPHP 基因的鑒定和表征有助于理解囊腫形成的分子機制。
髓質(zhì)囊性腎病（最近被命名為腎小管間質(zhì)腎病 TKD）是由MUC1和UMOD突變引起的，被認為是常染色體顯性遺傳 NPHP，其發(fā)病時間晚于隱性遺傳。
其他纖毛基因突變
一些基因突變可能與ARPKD類似，而這些基因通常會導(dǎo)致其他（通常更復(fù)雜的）纖毛病，例如Bardet-Biedl綜合征（BBS）、Joubert綜合征（JS）和Meckel綜合征（MKS）。BBS的表型可能存在異質(zhì)性，但通常表現(xiàn)為腎臟腫大、回聲增強，并伴有皮髓質(zhì)分化缺失。最嚴重的纖毛病是MKS和JS，其特征是早發(fā)性發(fā)育障礙和神經(jīng)系統(tǒng)問題，以及許多纖毛病的特征，例如肝纖維化、多指畸形和囊性腎。
另一個例子是馮·希佩爾-林道綜合征（Von Hippel-Lindau），這是一種由腫瘤抑制基因VHL突變引起的常染色體顯性遺傳病。該病會導(dǎo)致中樞神經(jīng)系統(tǒng)血管母細胞瘤，并伴有腎臟腫瘤。患者還很可能出現(xiàn)腎臟和胰腺囊腫。結(jié)節(jié)性硬化癥（TSC）、VHL和多囊腎?。≒KD）表現(xiàn)的相似性提示它們之間存在功能聯(lián)系：初級纖毛和mTOR信號通路。
ARPKD的致病基因鑒定基因解碼
佳學(xué)基因檢測之前提到，常染色體隱性多囊腎病 (ARPKD) 是由PKHD1基因突變以及最近發(fā)現(xiàn)的DZIP1L 基因突變引起的。PKHD1位于 6 號染色體 (6p12.3-p12.2)（圖2 A），是人類最大的基因之一，其基因組片段長約 500 kb。預(yù)計該基因至少有 86 個外顯子，以復(fù)雜的可變剪接變體模式組裝，轉(zhuǎn)錄出約 8.5 kb–13 kb 的全長 mRNA 。已在該基因中鑒定出多種類型的致病突變。目前，已鑒定出約 750 種PKHD1突變，其中約一半是錯義突變。外顯子 3 的錯義突變 (c. 107C>T; p.Thr36Me) 是所描述的最常見突變，占所有病例的 20% 以上 。這種突變已在雜合子的情況下觀察到，具有第二個不同的突變等位基因。大多數(shù)病例是家族性的，但也有報道說存在新生突變，占病例的 2% 至 5%。有趣的是，在孤立性常染色體顯性多囊肝病 (ADPLD) 的背景下，Besse 及其同事報道了幾名患有PKHD1突變的雜合子攜帶者，他們隊列中的 102 名 ADPLD 患者中有 10 名可由PKHD1突變解釋，其中一名出現(xiàn) p.Thr36Me 錯義變異。臨床觀察顯示，10% 的 常染色體隱性多囊腎病 (ARPKD) 患者表現(xiàn)為無數(shù)無癥狀肝囊腫，這是一個遺傳事實。然而，這些數(shù)據(jù)不足以解釋為什么常染色體隱性多囊腎病 (ARPKD) 中的PKHD1會導(dǎo)致嚴重的肝腎表型，而在 ADPLD 中卻不會；在這方面，佳學(xué)基因檢測正在進行更多的基因解碼。
圖 2.常染色體隱性多囊腎病 (ARPKD) 基因、轉(zhuǎn)錄本和蛋白質(zhì)：( A ) PKHD1和DZIP1L基因及轉(zhuǎn)錄本。圖中標出了外顯子的位置和編號，并顯示了兩者最長的轉(zhuǎn)錄本：PKHD1有 67 個外顯子， DZIP1L有 16 個外顯子；( B ) 纖維囊蛋白/多聚導(dǎo)管蛋白 (FPC) 和 DAZ 相互作用蛋白 1 樣蛋白 (DZIP1L) 的結(jié)構(gòu)。蛋白質(zhì)未按比例繪制。
佳學(xué)基因檢則利用全基因組 SNP 分析、全外顯子組測序和桑格測序，確定了位于 3 號染色體 (3q22.1-q23) 上的DZIP1L （圖 2 A），該基因編碼一個由 767 個氨基酸組成的蛋白質(zhì)，是一個與 常染色體隱性多囊腎病 (ARPKD) 發(fā)病機制相關(guān)的新基因。基因解碼在 7 名具有常染色體隱性多囊腎病 (ARPKD) 表型的患者（約占其患者的 0.3%）中發(fā)現(xiàn)了突變，而這些患者沒有 PKD 基因的其他突變證據(jù)。他們在兩個家族中發(fā)現(xiàn)了與該疾病分離的純合錯義突變（p.Gln91His 和 p.Ala90Val），并在另外兩個無關(guān)的近親家系中發(fā)現(xiàn)了純合蛋白截短突變（p.Gln155* 和 p.Glu354Alafs*39）。數(shù)據(jù)表明DZIP1L突變不是該疾病的常見原因，但盡管如此，常染色體隱性多囊腎病 (ARPKD) NGS 診斷多基因面板應(yīng)該針對該基因，原因有二：DZIP1L突變可能與其他 PKD 或纖毛病基因座相互作用，并有助于拓寬對該疾病遺傳復(fù)雜性的理解。
基因型-表型相關(guān)性
復(fù)合雜合子的存在使得建立可能的基因型/表型關(guān)聯(lián)變得復(fù)雜。最常見的突變是 c.107C>T (T36M)，它僅能解釋約 20% 的突變等位基因，其他突變均未被描述為一個簇；事實上，許多變異是單個譜系所特有的。PKHD1 中存在多種致病變異，包括截短突變、錯義突變以及內(nèi)含子/剪接突變。通常，基因型-表型研究更多地關(guān)注突變的類型，而非突變的具體位點。
攜帶兩個截短突變的患者表現(xiàn)出嚴重的表型，圍產(chǎn)期或新生兒死亡率較高，而存在一個或兩個錯義突變的患者通常表現(xiàn)出中等程度的表型。然而，也有例外，Ebner 等人描述的一位攜帶兩個PKHD1截短突變的患者在未接受腎臟替代治療的情況下存活了出生后 30 個月；或者相反，幾例攜帶兩個錯義突變的患者病情可能與截短突變一樣嚴重。
此外，高達 20% 的兄弟姐妹表現(xiàn)出明顯的表型差異，這意味著基因型不足以解釋常染色體隱性多囊腎病 (ARPKD) 的表型變異，其中復(fù)雜的轉(zhuǎn)錄譜可能發(fā)揮重要作用。此外，有證據(jù)表明，在具有其他基因變異的 常染色體隱性多囊腎病 (ARPKD) 小鼠模型中，該疾病得到了改變；例如，Pkhd1 和 Pkd1 突變的共同遺傳會使表型惡化；這在人類中是相關(guān)的，其中另一個 ADPKD 基因（ PKD2 ）的突變也會使腎臟表現(xiàn)惡化 。人們還認為，表觀遺傳學(xué)和環(huán)境因素，以及與 PKD 相關(guān)的其他基因的遺傳變異，可以解釋家庭間和家庭內(nèi)的變異。
通過基因指導(dǎo)氨基酸聚合形成的ARPKD蛋白：結(jié)構(gòu)和功能
PKHD1的蛋白產(chǎn)物是纖維囊蛋白/多聚導(dǎo)管蛋白/FPC（圖 2 B），它是一種膜蛋白，具有較長的胞外 N 末端、一個跨膜結(jié)構(gòu)域和一個較短的胞質(zhì) C 末端尾巴。胞外結(jié)構(gòu)域含有 12 個 TIG/IPT 結(jié)構(gòu)域（免疫球蛋白樣結(jié)構(gòu)域），這些結(jié)構(gòu)域已在細胞表面受體中描述。此外，在胞質(zhì)尾區(qū)還鑒定出三個可能與其功能相關(guān)的蛋白激酶 A (PKA) 磷酸化位點。據(jù)報道，PKHD1同源物PKHD1L的同一性和相似性分別為 25% 和 41.5%，它編碼纖維囊蛋白-L，這是一種可誘導(dǎo) T 淋巴細胞表達的受體，尚未發(fā)現(xiàn)與 PKD 有關(guān)。 FPC 最長的開放閱讀框 (ORF) 預(yù)測長度為 4074 個氨基酸。然而，PKHD1基因的剪接模式復(fù)雜，可編碼多種其他基因產(chǎn)物。同樣，F(xiàn)PC 表現(xiàn)出高度復(fù)雜的 Notch 樣蛋白水解加工模式，該模式已在體外和使用小鼠模型的體內(nèi)得到驗證，這使得PKHD1 /FPC的研究尤為困難。
FPC 是一種 440 kDa 膜結(jié)合蛋白，主要在腎臟（皮質(zhì)管和髓質(zhì)管）、肝臟（肝內(nèi)和肝外膽管）和胰腺（胰管）中表達。檢測到兩種分別為 ~ 230和~ 140 kDa 的 FPC 產(chǎn)物，更重要的是，在分泌的 FPC 產(chǎn)物的細胞級分中發(fā)現(xiàn)了 ~140 kDa 產(chǎn)物。在亞細胞水平上， FPC在腎上皮細胞和膽管細胞的初級頂端纖毛和纖毛基底體區(qū)中表達。此外，F(xiàn)PC 也在集合管細胞的頂端膜和細胞質(zhì)中表達。 常染色體隱性多囊腎病 (ARPKD) 組織是否缺乏 FPC 表達存在爭議，一些研究支持這一觀點，但其他證據(jù)則表明并非如此，這表明 FPC 剪接變體在時間和空間上表達復(fù)雜。
FPC 的結(jié)構(gòu)提示該細胞表面受體可能具有一定的功能，其通過 N 端與細胞外配體相互作用，或通過 C 端將細胞內(nèi)信號傳遞至細胞核。胞質(zhì)尾部在全長裂解后可轉(zhuǎn)位至細胞核。然而，C 端的內(nèi)在機制也被佳學(xué)基因檢測進行解碼，因為在小鼠模型中，C 端的缺失并未導(dǎo)致腎臟或肝臟囊性表型，這表明它對 常染色體隱性多囊腎病 (ARPKD) 中的囊腫形成并非至關(guān)重要。
DZIP1L編碼 DAZ（無精子癥缺失）相互作用蛋白 1 樣蛋白，這是一種鋅指蛋白，具有多個卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域和一個靠近 N 端的 C2H2 型鋅指結(jié)構(gòu)域。鋅指蛋白 DZ??IP1L 參與初級纖毛的形成，佳學(xué)基因解碼認為它可能在多囊蛋白/PC（ADPKD 蛋白）的運輸中發(fā)揮作用。研究結(jié)果強調(diào)纖毛過渡區(qū)可能是研究 常染色體隱性多囊腎病 (ARPKD) 發(fā)病機制的一個新的關(guān)鍵點。
ARPKD的發(fā)病機制/分子基礎(chǔ)/疾病機制
ARPKD嚙齒動物模型：從動物模型中吸取的教訓(xùn)
迄今為止，已開發(fā)出多種與人類 常染色體隱性多囊腎病 (ARPKD) 非常相似的動物模型（表 1）。早期 PKD 模型是由非直系同源基因的自發(fā)突變引起的，這些基因模擬了該疾病的隱性性狀和表型。1985年報道的第一個小鼠模型是先天性多囊腎小鼠，即cpk。對該模型中疾病的發(fā)展和表現(xiàn)/外顯率以及遺傳學(xué)進行了廣泛的研究。cpk模型導(dǎo)致C57BL /6J (B6) 品系發(fā)生自發(fā)突變，該突變與Cys1基因相對應(yīng)。后來，在 20 世紀 90 年代，出現(xiàn)了其他基因座自發(fā)突變的模型，包括已充分研究的pcy小鼠，其Nphp3基因座發(fā)生突變。此外，還描述并表征了BALB/c 多囊腎 ( bpk ) 和幼年囊性腎模型 ( jck ) ，它們分別在Bicc1和Nek8中發(fā)生自發(fā)突變。隨后，通過化學(xué)誘導(dǎo)設(shè)計動物模型，如使用苯丁酸氮芥誘變程序獲得的幼年先天性多囊腎 ( jcpk ) 。有趣的是，后來的研究表明，bpk和jcpk模型可以改進Bicc1基因中的突變位點。此外，通過插入誘變，從大規(guī)模插入誘變程序中發(fā)現(xiàn)了Oak Ridge 多囊腎或orpk小鼠。
表 1.常染色體隱性多囊腎病 (ARPKD) 的現(xiàn)有動物模型列表，或模擬其表型的動物模型列表。根據(jù)已發(fā)表的數(shù)據(jù)，動物模型按從最早到最新的順序排列。
ARPKD 現(xiàn)有動物模型或模擬其表型的動物模型（按發(fā)表時間從舊到新排序）
| 模型名稱 | 物種 | 基因 | 等位基因類型（突變類型） | 肝臟表型 | 腎臟表型 | 其他表型 | 參考文獻 |
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 模擬 ARPKD 的動物模型 | |||||||
| cpk (Cys1<sup>cpk</sup>) * | 小鼠 | Cys1 | 自發(fā)性 |
? 肝囊腫 ? 膽管擴張 ? 肝纖維化 |
? 腎囊腫 ? 腎腫大 |
? 胰腺囊腫 | [77,93–96] |
| pcy (DBA/2-pcy/pcy) (Nphp3<sup>pcy</sup>) * | 小鼠 | Nphp3 | 自發(fā)性 | 無 |
? 腎囊腫 ? 腎腫大 ? 腎纖維化 |
? 顱內(nèi)動脈瘤 | [79,80,97] |
| bpk (Bicc1<sup>jcpk-bpk</sup>) * | 小鼠 | Bicc1 | 自發(fā)性 | ? 膽管擴張 |
? 腎囊腫 ? 腎腫大 |
? 早逝 ? 出生后致死 |
[81] |
| jck (Nek8<sup>jck</sup>) * | 小鼠 | Nek8 | 自發(fā)性 | 無 |
? 腎囊腫 ? 腎腫大 |
? 早逝 | [82] |
| orpk (Ift88<sup>Tg737Rpw</sup>) * | 小鼠 | Ift88 | 轉(zhuǎn)基因（插入） |
? 膽管結(jié)構(gòu)異常 ? 肝纖維化 |
? 腎囊腫 ? 腎腫大 |
? 胰腺囊腫 ? 多指畸形 |
[87,88] |
| jcpk | 小鼠 | Bicc1 | 化學(xué)誘導(dǎo) | ? 膽管擴張 |
? 腎囊腫 ? 腎小管擴張 |
? 胰腺導(dǎo)管擴張 | [85] |
| 模型名稱 | 物種 | 基因 | 等位基因類型（突變類型） | 肝臟表型 | 腎臟表型 | 其他表型 | 參考文獻 |
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| ARPKD 動物模型 | |||||||
| PCK | 大鼠 | Pkhd1 | 自發(fā)性（剪接突變） |
? 肝囊腫 ? 膽管擴張 ? 肝纖維化 |
? 腎囊腫 ? 腎腫大 ? 腎纖維化 |
? 胰腺囊腫 | [89,98] |
| Pkhd1<sup>ex40</sup> | 小鼠 | Pkhd1 | 靶向敲除（插入） |
? 肝囊腫 ? 肝纖維化 |
無 | ? 門脈高壓 | [90] |
| Pkhd1<sup>del2/del2</sup> (Pkhd1<sup>tm1Cjwa</sup>) * | 小鼠 | Pkhd1 | 靶向敲除（缺失） |
? 肝囊腫 ? 膽管擴張 ? 肝纖維化 |
? 腎囊腫 ? 腎小管擴張 |
? 胰腺囊腫 ? 胰腺導(dǎo)管異常 |
[99] |
| Pkhd1<sup>del3–4</sup> (Pkhd1<sup>tm1.1Ggg</sup>) * | 小鼠 | Pkhd1 | 靶向敲除（缺失） |
? 肝囊腫 ? 肝纖維化 |
? 腎囊腫 ? 腎纖維化 |
? 胰腺囊腫 ? 膽總管囊腫 ? 上行性膽管炎 |
[60] |
| Pkhd1<sup>del4/del4</sup> (Pkhd1<sup>tm1Som</sup>) * | 小鼠 | Pkhd1 | 靶向敲除（缺失） |
? 肝囊腫 ? 膽道囊腫 ? 肝纖維化 |
無 |
? 胰腺囊腫 ? 胰腺纖維化 ? 脾腫大 |
[100] |
| Pkhd1<sup>e15GFPΔ16</sup> (Pkhd1<sup>tm1Gwu</sup>) * | 小鼠 | Pkhd1 | 靶向敲除（缺失） |
? 肝囊腫 ? 肝纖維化 |
? 腎囊腫 ? 腎小管擴張 ? 腎纖維化 |
? 胰腺囊腫 ? 胰腺導(dǎo)管擴張 ? 胃腸道潰瘍 |
[101] |
| Pkhd1<sup>lacZ</sup> (Pkhd1<sup>tm1Sswi</sup>) * | 小鼠 | Pkhd1 | 靶向敲除（缺失） |
? 膽管擴張 ? 肝纖維化 |
? 腎囊腫 ? 腎小管擴張 ? 腎纖維化 |
? 胰腺囊腫 | [102] |
| Pkhd1<sup>LSL(-)</sup> (Pkhd1<sup>tm2Cjwa</sup>) * | 小鼠 | Pkhd1 | 靶向敲除（插入） |
? 肝囊腫 ? 肝纖維化 |
? 腎囊腫 ? 腎小管擴張 |
? 未知 | [103] |
| Pkhd1<sup>Δ67</sup> | 小鼠 | Pkhd1 | 靶向敲除（缺失） | 無 | 無 | 無 | [67] |
| Dzip1l<sup>wpy/wpy</sup> (Dzip1l<sup>warpy</sup>) * | 小鼠 | Dzip1l | 靶向敲除（點突變） | ? 膽管結(jié)構(gòu)異常 |
? 腎囊腫 ? 腎小管擴張 |
? 多指畸形 ? 眼部結(jié)構(gòu)異常 ? 上唇裂 ? 腭裂 |
[37] |
| Pkhd1<sup>C642*</sup> (Pkhd1<sup>em1Mrug</sup>) * | 小鼠 | Pkhd1 | 靶向敲除（缺失） |
? 肝囊腫 ? 膽道囊腫 ? 肝纖維化 |
? 腎小管擴張 ? 近端腎小管擴張 |
? 未知 | [67] |
* 模型名稱根據(jù) MGI (小鼠基因組信息學(xué)) 。Ref. = 參考。KO = 敲除。
21 世紀，隨著PKHD1作為 常染色體隱性多囊腎病 (ARPKD) 主要基因被發(fā)現(xiàn)，首個 常染色體隱性多囊腎病 (ARPKD) 動物模型出現(xiàn)。多囊腎大鼠或 PCK 大鼠因其緩慢進展的腎臟和肝臟疾病而被最初提議作為 ADPKD 模型，但后來證實PCK 大鼠的Pkhd1基因被破壞。首個基于Pkhd1的轉(zhuǎn)基因小鼠模型是Pkhd1 ex40，后來出現(xiàn)了許多其他模型，以及基于Dzip1l的模型（表 1）。值得注意的是，肝臟 常染色體隱性多囊腎病 (ARPKD) 樣表型始終存在于所有基于Pkhd1的模型中，但腎臟表型通常缺失。有趣的是，與 常染色體隱性多囊腎病 (ARPKD) 患者不同，這些模型中經(jīng)常出現(xiàn)胰腺囊腫 [ 6 ]。
常染色體隱性多囊腎病 (ARPKD) 中囊腫形成的關(guān)鍵或主要分子機制仍不清楚。盡管如此，動物模型使我們能夠擴展對該疾病不同階段的理解，從囊腫形成到囊腫進展。在這個復(fù)雜的過程中，已經(jīng)描述了幾種改變的分子通路，例如液體分泌、細胞異常增殖（如 mTOR、RAS-RAF-ERK 和 AKT）、由 PKA 激酶和 AC6 調(diào)控的 cAMP 通路、細胞外基質(zhì) (ECM) 改變等。因此，近幾十年來，由于存在多種動物模型，對 常染色體隱性多囊腎病 (ARPKD) 病理生理學(xué)的理解有所提高。然而，常染色體隱性多囊腎病 (ARPKD) 中囊腫形成的關(guān)鍵內(nèi)在分子機制仍然未知，導(dǎo)致人們對了解該疾病的機制和開發(fā)新的治療策略越來越感興趣。接下來，我們回顧一下 常染色體隱性多囊腎病 (ARPKD) 中的主要分子通路。
EGFR軸表達和液體分泌異常
1992 年，通過證明 PKD 患者原代培養(yǎng)細胞可增加囊腫擴張，首次發(fā)現(xiàn)了 PKD 中表皮生長因子受體 (EGFR) 軸發(fā)生改變的證據(jù)。隨后，在從 ADPKD 患者分離的原代細胞中，表皮生長因子 (EGF) 刺激了囊腫形成。在 常染色體隱性多囊腎病 (ARPKD) 中，第一批數(shù)據(jù)來自cpk小鼠模型腎臟提取物，結(jié)果顯示 EGF 表達上調(diào)。逐漸地，其他證據(jù)也表明 EGFR 在體外、小鼠模型和 常染色體隱性多囊腎病 (ARPKD) 患者中發(fā)揮了重要作用，其中 EGFR 上調(diào)位于囊性上皮表面。同樣，已證實 常染色體隱性多囊腎病 (ARPKD) 患者存在EGF 和轉(zhuǎn)化生長因子 α (TGFα)的異常表達，且 常染色體隱性多囊腎病 (ARPKD) 嚙齒動物模型中發(fā)現(xiàn) EGFR 受體家族的幾個成員（EGFR1、ErbB2 和 ErbB4）過表達（圖 3 A）。這種過表達包括 mRNA、蛋白質(zhì)和受體活性或磷酸化的增加。此外，動物模型的證據(jù)表明 EGFR 軸的肝囊腫形成中存在類似的異常。
圖 3.ARPKD分子發(fā)病機制：( A ) ARPKD腎上皮細胞中可能上調(diào)、下調(diào)或失調(diào)的通路及可能的潛在治療方法；( B ) ARPKD蛋白在腎上皮細胞纖毛中的定位示意圖。FPC位于纖毛的初級頂端及基體區(qū)域，而DZIP1L位于纖毛基體的過渡區(qū)。 （FPC—纖維囊蛋白/多聚導(dǎo)管蛋白；DZIP1L—DAZ 相互作用鋅指蛋白 1 樣；PC1—多囊蛋白 1；PC2—多囊蛋白 2；TGF—轉(zhuǎn)化生長因子；ENaC—上皮鈉通道；Na + —鈉陽離子；EGFR—表皮生長因子受體；VEGF—血管內(nèi)皮生長因子；Cl − —氯陰離子；SMURF—SMAD 特異性 E3 泛素蛋白連接酶；Nedd4-2—E3 泛素蛋白連接酶 Nedd4-2；SRC—原癌基因酪氨酸蛋白激酶 Src；AKT—RAC-alpha 絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶；Ca + —鈣陽離子；PDE—磷酸二酯酶；mTOR—雷帕霉素哺乳動物靶蛋白；MAPK—絲裂原活化蛋白激酶；RAF—快速加速纖維肉瘤；MEK—絲裂原活化蛋白激酶激酶；ERK—細胞外信號調(diào)節(jié)激酶；Rhoa—Ras 同源物家族成員 A；ER—內(nèi)質(zhì)網(wǎng)；PKA—蛋白激酶 A；cAMP—環(huán)磷酸腺苷（環(huán) AMP）；ATP—三磷酸腺苷；AC6—腺苷酸環(huán)化酶 6 型；AQP2—水通道蛋白 2；V2R—加壓素受體 2；AVP—精氨酸加壓素；MMPs—基質(zhì)金屬蛋白酶）。
EGFR信號傳導(dǎo)與囊腫形成相關(guān)，EGFR酪氨酸激酶活性上調(diào)與囊腫生長之間存在相關(guān)性。改良的orpk模型（wa2小鼠）通過點突變降低EGF酪氨酸激酶活性，結(jié)果顯示囊腫形成顯著減少，腎功能改善。此外，使用EGFR特異性酪氨酸激酶抑制劑進行藥物抑制可降低EGFR活性，從而顯著減緩囊腫進展 。有爭議的是， PCK大鼠的EGFR酪氨酸激酶抑制劑并未減緩腎囊腫的進展。
上皮分泌是囊腫形成的關(guān)鍵病理生理學(xué)組成部分。常染色體隱性多囊腎病 (ARPKD) 凈液體分泌中鈉攝取量的減少被認為與上皮細胞鈉通道 α 亞基中 EGF 的減少有關(guān)。然而，關(guān)于這一主題的研究數(shù)據(jù)相互矛盾。在源自 常染色體隱性多囊腎病 (ARPKD) 患者囊腫的細胞中，有人認為鈉的吸收是由上皮細胞鈉通道 (ENaC) 介導(dǎo)的。此外，該機制被認為是 常染色體隱性多囊腎病 (ARPKD) 高血壓的調(diào)節(jié)劑。
另一方面，數(shù)據(jù)顯示，在ADPKD中，Cl−分泌是通過囊性纖維化跨膜傳導(dǎo)調(diào)節(jié)器（CFTR）進行的。然而，在ARPKD中，這種機制似乎沒有相關(guān)性。在bpk小鼠模型中，CFTR的缺失并未減緩腎臟和肝臟囊腫的進展。這些數(shù)據(jù)表明，ADPKD和ARPKD中Cl−和液體分泌的機制不同。
cAMP與增殖
多項研究表明，腺苷酸環(huán)化酶腺苷3′,5′-環(huán)磷酸腺苷 (cAMP) 通路可刺激ARPKD和ADPKD患者腎臟上皮細胞增殖。囊腫上皮細胞中 cAMP 生成異常，導(dǎo)致囊液中 cAMP 含量高。cAMP 可激活 ADPKD 患者腎臟囊腫上皮細胞中的 B-Raf、MEK 和 ERK 通路，以及培養(yǎng)的 ADPKD 和 常染色體隱性多囊腎病 (ARPKD) 細胞中的 B-Raf、MEK 和 ERK 通路。同樣，這些結(jié)果與一些數(shù)據(jù)相輔相成，這些數(shù)據(jù)顯示在幾種 常染色體隱性多囊腎病 (ARPKD) 嚙齒動物模型中，MAPK 和 AKT/mTOR 通路在蛋白質(zhì)水平上調(diào)。這些事實與細胞內(nèi) Ca 2+的減少和 SCR 蛋白的磷酸化相關(guān)。尤其是，阻斷細胞內(nèi) Ca 2+可提高培養(yǎng) 常染色體隱性多囊腎病 (ARPKD) 細胞中的 AKT 和增殖活性。這項研究為將細胞內(nèi)鈣水平恢復(fù)作為 PKD 的治療方法提供了機會。
PKD 中鈣失調(diào)導(dǎo)致加壓素 V2 受體上調(diào)，從而激活 cAMP/PKA 級聯(lián)。在臨床前試驗中，V2 受體拮抗劑已證明其在 常染色體隱性多囊腎病 (ARPKD) 大鼠模型中有效，可降低腎臟 cAMP 水平并改善囊性腎病 （圖 3 A）。這一事實已在 ADPKD 的臨床前 和臨床水平得到進一步研究、審查和理解，以至于托伐普坦（一種加壓素 V2 受體抑制劑）被批準用于人類患者，并且目前正在進行針對 ADPKD 兒童的試驗（托伐普坦 ( NCT02964273 )）。常染色體隱性多囊腎病 (ARPKD) 相關(guān)的臨床試驗將在稍后進行審查。
ARPKD病理生理學(xué)涉及的其他途徑
在 常染色體隱性多囊腎病 (ARPKD) 中還發(fā)現(xiàn)了其他致病特征，以及細胞外基質(zhì) (ECM) 和金屬蛋白酶 (MMP) 表達的改變、Pkhd1缺陷細胞中血管內(nèi)皮生長因子 (VEGF) 和缺氧誘導(dǎo)因子-1α (HIF-1α) 的上調(diào)、動物模型中過氧化物酶體增殖激活受體-γ (PPAR-γ) 的上調(diào)或代謝改變。在一項大型有趣的研究中，Kaimori 及其同事發(fā)表了有關(guān) FPC 與 C2-WWW-HECT 結(jié)構(gòu)域 E3 泛素連接酶家族成員之間的新功能關(guān)系的信息。作者將 FPC 定位在同時存在 Ndfip2 的囊泡中，Ndfip2 是一種泛素連接酶相互作用蛋白，參與運輸和調(diào)節(jié) Nedd4-2 泛素連接酶家族以及 SMURF1 和 SMURF2。這些數(shù)據(jù)可能通過 TGF-β 信號通路解釋 常染色體隱性多囊腎病 (ARPKD) 和腎臟和肝臟纖維化中的不同普遍表型，通過 ENaC 介導(dǎo)的鈉重吸收解釋高血壓，通過 RhoA 泛素化和細胞骨架組織解釋囊腫形成（圖 3 A）。在其他研究中，PKD 中的管狀形態(tài)發(fā)生與平面細胞極性 (PCP) 異常有關(guān)。然而，后來的研究卻得出了相反的結(jié)果。
纖毛的作用
圖 3顯示 常染色體隱性多囊腎病 (ARPKD) 蛋白（鋅指蛋白 DZ??IP1L 和 FPC）位于纖毛中。纖毛是從哺乳動物細胞表面發(fā)出的長而微管的結(jié)構(gòu)。初級纖毛的軸絲包含 9 個外周微管束（9 + 0 模式）。與正常纖毛功能喪失相關(guān)的病理稱為纖毛病，包括 常染色體隱性多囊腎病 (ARPKD) 。PC2 也稱為 TRPP2，是瞬時受體通道 (TRP) 家族的成員，是一種鈣通透性非選擇性通道。PC2 和 PC1 形成受體-通道復(fù)合物，參與鈣通路和纖毛反應(yīng)（圖 3B）。已證實 FPC 能與初級纖毛中的 PC2 相互作用并調(diào)節(jié) PC2 通道活性。此外，據(jù)報道，在體內(nèi)和體外，F(xiàn)PC 的 C 端與 PC2 的 N 端會發(fā)生物理相互作用，并且Pkhd1缺陷細胞表現(xiàn)出 PC2 通道活性失調(diào)。然而，Wang 等人發(fā)現(xiàn)，在 FPC 水平降低的細胞中，PC2 水平?jīng)]有差異。使用新型Pkhd1小鼠模型的其他數(shù)據(jù)顯示，刪除Pkhd1的最后一個外顯子、PC2 結(jié)合位點和核定位信號對小鼠沒有明顯的病理影響。此外，研究人員無法在轉(zhuǎn)基因小鼠模型的腎臟樣本中共沉淀 FPC-PC2。這些結(jié)果表明，F(xiàn)PC 的 PC2 結(jié)合域?qū)w維囊蛋白功能并非至關(guān)重要。
我們已描述了Pkd1和Pkhd1之間的遺傳相互作用，將 ADPKD 和 常染色體隱性多囊腎病 (ARPKD) 聯(lián)系在一起。因此，更多數(shù)據(jù)報道了其他嚙齒動物模型中Pkd1和Pkhd1之間的這種遺傳相互作用，描述了Pkd1和/或Pkhd1的輕度囊性疾病表型結(jié)合起來會增強其嚴重程度 。這些研究以及其他研究擴展了 FPC 和 PC1 之間的關(guān)系。使用體外模型，F(xiàn)PC 的缺失不會影響 PC1 的生物合成和定位，這表明 Pkd1 和 Pkhd1 之間的遺傳相互作用是間接的。
這些研究結(jié)果似乎與以下觀點一致：PKD 蛋白在纖毛中形成功能性復(fù)合物，并具有共同的下游信號通路。有趣的是，纖毛丟失可抑制 ADPKD 小鼠模型和常染色體顯性多囊肝病 (ADPLD) 小鼠模型中的腎囊腫生長。然而，在最近的一項研究中，Gallagher 和 Somlo 報告稱，纖毛的丟失并不能減緩 常染色體隱性多囊腎病 (ARPKD) 肝病的進展。這些數(shù)據(jù)表明，至少在肝囊性表型中，ADPKD 和 常染色體隱性多囊腎病 (ARPKD) 沒有共同的纖毛相關(guān)通路。
另一方面，根據(jù)多項細胞培養(yǎng)研究、斑馬魚和小鼠的發(fā)現(xiàn)，DAZ 相互作用蛋白 1 樣蛋白 (DZIP1L) 定位于中心粒和纖毛過渡區(qū)初級纖毛。Lu 等人證明了 DZIP1L 與 septin 2 (SEPT2) 之間的相互作用，SEPT2 是一種參與維持過渡區(qū)纖毛周圍擴散屏障的蛋白質(zhì)，并且 DZIP1L 與纖毛過渡區(qū)蛋白 tectonic 1 (TCTN1) 共定位。在DZIP1L突變細胞中，多囊蛋白-1 和 -2 從基體到纖毛軸絲的運輸發(fā)生改變；當它們正常分布在纖毛軸絲中時，兩者都保留在基體中。然而，DZIP1L缺乏不會改變 FPC 的定位或表達 [ 37 ]。這些發(fā)現(xiàn)表明DZIP1L在多囊蛋白的運輸中發(fā)揮著作用，并提供了將 常染色體隱性多囊腎病 (ARPKD) 與 ADPKD 聯(lián)系起來的新證據(jù)。
臨床試驗
正如我們之前所指出的，PKD囊腫形成的核心或關(guān)鍵機制尚不清楚。細胞和動物研究表明，PKD的發(fā)病機制涉及多種途徑。這些事實使得多種藥物得以進入臨床階段（表2）。
表 2.目前正在進行或已完成 常染色體隱性多囊腎病 (ARPKD) 臨床試驗。
| 編碼 | 藥物 |
研究設(shè)計 和特征 |
研究描述 | 贊助 |
|---|---|---|---|---|
| NCT04782258 | 托伐普坦 |
?研究類型：介入性 ?主要目的：治療 ?時間：2021年4月-2025年6月（預(yù)估） ?患者：20人（預(yù)估，尚未招募） ?分配：非隨機 ?干預(yù)模式：平行分配 ?掩蔽：無（開放標簽） |
?本項三期臨床試驗的主要目的是評估托伐普坦 (OPC-41061) 對 8 天至 18 歲以下 常染色體隱性多囊腎病 (ARPKD) 嬰兒和兒童的安全性。 ?本研究的參與者將被分配服用托伐普坦 18 個月，并在研究期間接受密切監(jiān)測。 |
大冢 制藥開發(fā)與商業(yè)化公司， 美國新澤西州普林斯頓。 |
| NCT04786574 | 托伐普坦 |
?研究類型：干預(yù) ?主要目的：治療 ?時間：2021 年 4 月 - 2025 年 7 月（預(yù)計） ?患者：20 名（預(yù)計，尚未招募） ?分配：N/A ?干預(yù)模式：單組分配 ?掩蔽：無（開放標簽） |
?本項3期試驗的主要目標是評估托伐普坦 (OPC-41061) 對28天至12周齡ARPKD患兒的安全性、耐受性和有效性。 ?本試驗的受試者將被分配接受托伐普坦治療24個月，并在研究期間接受密切監(jiān)測。 |
大冢 制藥開發(fā)與商業(yè)化公司， 美國新澤西州普林斯頓。 |
| NCT03096080 | 替塞瓦替尼 |
?研究類型：介入 ?主要目的：治療 ?時間：2017 年 3 月 - 2019 年 10 月（已完成） ?患者：10 例 ?分配：非隨機 ?干預(yù)模型：序貫分配 ?掩蔽：無（開放標簽） |
?本項1期試驗評估了Tesevatinib (KD019, XL647) 液體制劑單次遞增劑量給藥于ARPKD患兒（5-12歲兒童）的安全性和耐受性。 ?為確定Tesevatinib液體制劑對ARPKD患兒的安全性，所有受試者在入組第一天均接受活性研究藥物治療。 |
Kadmon Corporation, LLC 美國賓夕法尼亞州費城。 美國威斯康星州密爾沃基。 |
| NCT01401998 | 觀察性 |
?研究類型：觀察性 ?時間：2011 年 7 月 - 2022 年 12 月（招募） ?患者：200 名（預(yù)計） ?觀察模型：隊列 ?時間視角：回顧性任務(wù) |
?本研究收集ARPKD患者的臨床和遺傳信息，以拓展對疾病的認識。 ?本試驗的主要目標是創(chuàng)建一個臨床和突變數(shù)據(jù)庫，其中包含所有參與研究患者的臨床信息和基因突變識別信息。 ?突變數(shù)據(jù)庫將有助于促進遺傳學(xué)研究，例如基因型-表型相關(guān)性、新發(fā)病基因研究或修飾基因研究。 ?創(chuàng)建包含受累個體和對照個體的人體組織的組織資源。 |
Lisa M. Guay-Woodford （合作者： 美國國家糖尿病、消化和腎臟疾病研究所 (NIDDK)）。 美國華盛頓哥倫比亞特區(qū)。 |
| NCT00068224 | 觀察性 |
?研究類型：觀察性 ?時間：2003 年 9 月 - 2021 年 2 月（已完成） ?患者：374 例 ?觀察模型：隊列 ?時間視角：前瞻性 |
?本研究評估了纖毛病（包括ARPKD）患者。 ?研究的目的是更好地了解這些疾病的醫(yī)學(xué)并發(fā)癥，并找出有助于設(shè)計新療法的特征。 |
美國國家人類基因組研究所（NHGRI）。 美國馬里蘭州貝塞斯達。 |
狀態(tài)根據(jù)https://clinicaltrials.gov/，于 2021 年 4 月 6 日訪問。
根據(jù) 3 期和 4 期臨床試驗的結(jié)果，目前正在進行兩項使用托伐普坦藥物干預(yù)的臨床試驗。這些試驗的主要目的是評估托伐普坦對嬰兒（8 天或更小）和兒童（小于 18 歲）（NCT04782258）以及兒科患者（28 天至 12 周齡）（NCT04786574）的安全性。另一方面，PKD 表現(xiàn)出異常的 c-Src 活性，連接 cAMP 和 EGFR 分子途徑，并且其抑制可改善腎囊腫形成。這些數(shù)據(jù)促使 Sweeney 等人。研究EGFR軸、c-Src和VEGFR多激酶抑制劑特塞瓦替尼（TSV）作為ARPKD臨床前研究中的潛在療法的效果，并獲得了良好的結(jié)果。這些積極且有希望的結(jié)果促使ARPKD的TSV I期和II期臨床試驗獲得批準（NCT03096080）。最后，正在進行兩項觀察性試驗，以擴大對該疾病的了解（基因型-表型相關(guān)性、臨床方面），并創(chuàng)建更精確的突變和臨床數(shù)據(jù)庫（NCT01401998和NCT00068224）。
佳學(xué)基因觀點
在ARPKD研究領(lǐng)域，遺傳學(xué)、診斷學(xué)以及分子生物學(xué)方面均取得了重要進展。首先，PKHD1基因作為長期以來唯一與ARPKD相關(guān)的基因被成功鑒定，近期DZIP1L基因也被發(fā)現(xiàn)與該病密切相關(guān)，并被納入基于新一代測序（NGS）技術(shù)的基因診斷流程中。其次，科研人員對纖維囊蛋白/多聚導(dǎo)管蛋白的定位與功能有了更深入的理解。此外，通過對動物模型的研究，ARPKD的發(fā)病機制也逐步被揭示，并推動了潛在治療策略的探索。
與此同時，佳學(xué)基因正在持續(xù)深入推進對ARPKD的基因解碼工作。作為ARPKD的第二個已知致病基因，DZIP1L的發(fā)現(xiàn)，提示仍可能存在尚未識別的新致病基因。在這一背景下，亟需借助“基因未解析家系的全外顯子組測序”（GUR-WES）方法，對呈現(xiàn)ARPKD表型的個體進行系統(tǒng)解碼。目前FPC蛋白的確切功能尚不明朗，各亞型的特征也未被完全解析。此外，導(dǎo)致囊腫形成的關(guān)鍵分子機制仍不清楚。
正因如此，關(guān)于ARPKD的致病基礎(chǔ)仍存在諸多未知。目前仍缺乏獲批的替代性治療手段。因此，為了深入理解ARPKD的遺傳機制與細胞病理基礎(chǔ)，加強對該疾病的研究是推動診斷與治療突破的關(guān)鍵途徑。
